Prawf ELISA: beth yw'r egwyddor?

Prawf ELISA: beth yw'r egwyddor?

Diffiniad: beth yw'r prawf ELISA?

Mae'r dechneg assay immunoabsorption ensym cysylltiedig - yn Saesneg Immuno Assay Immuno Assay - neu brawf ELISA yn brawf imiwnolegol sy'n caniatáu canfod neu assay moleciwlau mewn sampl fiolegol. Cafodd ei gysyniadu a'i ddatblygu gan ddau wyddonydd o Sweden, Peter Perlmann ac Eva Engvall ym Mhrifysgol Stockholm ym 1971.

Mae'r moleciwlau a assayed gan y dull ELISA yn gyffredinol yn broteinau. Ac mae mathau o samplau yn cynnwys deunyddiau biolegol hylifol - plasma, serwm, wrin, perspirant -, cyfryngau diwylliant celloedd, neu brotein ailgyfunol - protein a gynhyrchir gan gell y mae ei deunydd genetig wedi'i newid trwy ailgyfuno genetig - wedi'i buro'n doddiant.

Defnyddir y prawf ELISA yn bennaf mewn imiwnoleg i ganfod a / neu fesur presenoldeb proteinau, gwrthgyrff neu antigenau mewn sampl. Mae'r prawf serolegol hwn yn canfod yn benodol y gwrthgyrff a gynhyrchir gan y corff mewn ymateb i halogiad firaol.

Egwyddor prawf ELISA ar gyfer clefydau heintus

Mae'r defnydd o wrthgyrff ar gyfer gwneud diagnosis o glefydau heintus yn cynrychioli dull penodol a chyflym. Mae techneg ELISA yn dechneg immuno-ensymatig sy'n ei gwneud hi'n bosibl delweddu, o sampl fiolegol, yr adweithiau rhwng antigen - corff sy'n cael ei ystyried yn dramor gan yr organeb fyw - ac gwrthgorff sy'n defnyddio adwaith lliw a gynhyrchir gan farciwr ensym - ffosffatase alcalïaidd a pherocsidase yn gyffredinol - ynghlwm yn flaenorol â'r gwrthgorff. Mae'r adwaith lliw yn cadarnhau adnabod y bacteriwm ynysig neu bresenoldeb y firws a ddymunir ac mae dwyster y lliw yn rhoi syniad o faint o antigenau neu wrthgyrff yn y sampl benodol.

Y gwahanol fathau o brofion ELISA

Mae pedwar prif fath o brawf ELISA:

  • ELISA yn uniongyrchol, yn ei gwneud hi'n bosibl canfod neu fesur gwrthgyrff. Dim ond gwrthgorff sylfaenol y mae'n ei ddefnyddio;
  • ELISA anuniongyrchol, y mwyaf eang a ddefnyddir, hefyd yn ei gwneud yn bosibl canfod neu assay gwrthgyrff. Mae'n defnyddio gwrthgorff eilaidd sy'n rhoi gwell sensitifrwydd iddo nag ELISA uniongyrchol;
  • ELISA mewn cystadleuaeth, yn caniatáu dos o antigenau. Wedi'i gynhyrchu gan gystadleuaeth am fondiau, nid yw'n defnyddio ensym;
  • ELISA «mewn brechdan», yn caniatáu dos o antigenau. Defnyddir y dechneg hon yn gyffredin mewn ymchwil.

Gan ddefnyddio'r prawf ELISA

Defnyddir y prawf ELISA ar gyfer:

  • Darganfod a mesur gwrthgyrff mewn seroleg ar gyfer gwneud diagnosis o glefydau heintus: firoleg, parasitoleg, bacterioleg, ac ati;
  • Proteinau dos ar grynodiadau isel: dosau penodol o broteinau plasma penodol (imiwnoglobwlin E (IgE), ferritin, hormonau protein, ac ati), marcwyr tiwmor, ac ati;
  • Dos moleciwlau bach: hormonau steroid, hormonau thyroid, cyffuriau…

Yr achosion mwyaf cyffredin: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, alergeddau, beichiogrwydd

Defnyddir y prawf ELISA yn benodol i wneud diagnosis o lawer o glefydau heintus:

Clefydau a drosglwyddir yn rhywiol (STDs)

Gan gynnwys hepatitis, syffilis, clamydia a HIV. Wedi'i argymell gan awdurdodau iechyd, hwn yw'r prif brawf sgrinio AIDS: mae'n dangos presenoldeb gwrthgyrff gwrth-HIV a'r antigen p24 chwe wythnos ar ôl yr haint.

Clefydau rhanbarthol neu endemig

Twymyn melyn, clefyd firws Marburg (MVM), Ladengue, clefyd Lyme, Chikungunya, twymyn Rift Valley, Ebola, twymyn Lassa, ac ati.

Y Covid-19

I'w gynnal fwy na 2 i 3 wythnos ar ôl i'r symptomau ddechrau, mae'r prawf ELISA yn ei gwneud hi'n bosibl nodi, mewn llai nag awr, bresenoldeb gwrthgyrff gwrth-SARS-CoV-2.

Pathogenau firaol sy'n achosi heintiau cyn-geni

Tocsoplasmosis, rwbela, cytomegalofirws, herpes simplex er enghraifft.

Achosion eraill

Ond mae hefyd wedi dod o hyd i geisiadau i'w canfod:

  • Beichiogrwydd;
  • Clefydau hunanimiwn;
  • Alergenau bwyd: mae pennu meintiol cyfanswm imiwnoglobwlinau E (IgE) yn helpu wrth asesu a thrin alergeddau;
  • Aflonyddwch hormonaidd;
  • Marcwyr tiwmor;
  • Firysau planhigion;
  • A llawer mwy

Dibynadwyedd y prawf Covid-19

Fel rhan o ganfod gwrthgyrff gwrth-SARS-CoV-2, mae astudiaeth beilot a gynhaliwyd ym mis Awst 2020 gan yr Institut Pasteur, y CNRS, Inserm a Phrifysgol Paris yn cadarnhau dibynadwyedd y prawf ELISA: profodd y ddau brawf ELISA ddefnydd protein N cyfan SARS-CoV-2 (ELISA N) neu barth allgellog pigyn y firws (S) fel antigenau targed. Byddai'r dechneg hon yn ei gwneud hi'n bosibl adnabod gwrthgyrff mewn mwy na 90% o achosion, gyda chyfradd ffug-gadarnhaol isel iawn o 1%.

Pris ac ad-daliad y prawf ELISA

Yn cael eu cynnal mewn labordai dadansoddi ar bresgripsiwn meddygol, mae profion Elisa yn costio tua 10 ewro ac yn cael eu had-dalu ar 100% gan Yswiriant Iechyd.

O'u cynnal mewn canolfannau gwybodaeth, sgrinio a diagnostig am ddim (CeGIDD), gallant fod yn rhad ac am ddim ar gyfer HIV a SARS-CoV-2.

Gadael ymateb